Share

Др. Марина Марини, ординарный профессор Университета Болоньи

Перевод для BabelFAmily Дмитрий Ковалёва

Май 2011 года. Итальянская ассоциация борьбы с синдромом атаксии (AISA) в сотрудничестве с  подразделением AISA в регионе Эмилия Романья приняла решение о финансировании в 2010 году исследовательского проекта, предложенного Мариной Марини - ординарным профессором биологии и генетики на Кафедре гистологии, эмбриологии и прикладной биологии Факультета медицины и хирургии  Университета Болоньи «AlmaMater Studiorum».
Целью исследование является изучить воздействие антиоксиданта природного происхождение Токотриенола, который сам по себе является не лекарственным веществом, а пищевой добавкой (его можно определить как витамин Е усиленного действия).
Проект представляет собой 2-ую фазу исследования, начатого ранее и давшего многообещающие результаты у пяти пациентов, которые в настоящий момент продолжают курс лечения.

Токотриенол будет назначен на более короткий период, чем в пилотном исследования, однако, по утверждению команды исследователей, этого будет достаточно, чтобы проверить его биологическое (не терапевтическое) воздействие на состав крови пациентов.
Данный проект реализуется совместно с несколькими другими центрами, которые проводят подобные исследование (нами не финансируемые), объединенные общей целью победы над атаксией.
В рамках этого научного сотрудничества забор крови на этапе премедикации выполнялся  доктором Пини в госпитале “Маджьоре”, а подразделение Марины Марини занималось отделением эритроцитов и лейкоцитов от плазмы с последующим получением из эритроцитов РНК и ДНК.
Эритроциты и плазму отправили в три разные лаборатории для проведения углубленного анализа: лабораторию CNR-ISOF в Болоньи, лабораторию профессора Манфридини из университета Феррара и лабораторию профессора Модести во Флоренции. Анализ этих образцов все еще не закончен, а его конечной целью является определить некоторые параметры, по которым можно сделать вывод о степени окислительного стресса до и после лечения.
Ниже приведено краткое описание проекта исследования, любезно предоставленное нам доктором Марини.

Предпосылки к исследованию

Мы завершили предварительное исследование применения антиоксиданта природного происхождения Токотриенола в группе пациентов с атаксией Фридрейха (координатором этой исследовательской группы был профессор Манфридини – фармаколог из Университета Феррара).
После годичного лечения Токотриенолом шести пациентов (пять из которых потом были исследованы классическим и новым методом МРТ) были получены обнадеживающие результаты. У всех пациентов отмечалось значительное повышение антиоксидантной защиты плазмы, кроме того наблюдалось положительное воздействие на миокард, подобное тому, которое отмечалось в ходе других исследований с приемом антиоксидантов. Также мы отметили тенденцию к стабилизации и/или улучшению маркеров метаболизма как в мышцах, так и в головном мозге. Благодаря своим высоким антиоксидантным и нейрозащитным свойствам Токотриенол дает многообещающую перспективу лечения пациентов с атаксией Фридрейха – заболевания, при котором фундаментальное значение имеет окислительный стресс.
Этот первый пилотный опыт может лечь в основу более длительного исследования, в котором примет участия большее число пациентов с атаксией Фридрейха. Будущий проект будет опираться на знания о природе и нейродегенеративных процессах, которыми мы уже обладаем.

Цель нового исследования

Чтобы лучше и глубже понять механизм действия Токотриенола мы намерены проверить, сможет ли это вещество, in vitro у пяти пациентов или in vivo в культуре клеток, способствовать повышению выработки фратаксина – белка, дефицит которого наблюдается при АФ. Для проведения подобного исследования был необходим бюджет в 5000 евро. Средства должны были пойти на закупку реактивов и другого лабораторного оборудования. Данные, этих начальных анализов позволят более точно сформулировать цели будущего исследования, определить научную основу и обозначить рамки дополнительных исследований на молекулярном уровне.
Это исследование, которое будет проводиться в Лаборатории клеточной и молекулярной биологии Кафедры гистологии, эмбриологии и прикладной биологии, будет состоять из двух отдельных частей. Первая часть будет заключаться в оценке генетической экспрессии фратаксина в лейкоцитах пациентов. Этот анализ будет проводиться методом PCR «в реальном времени», который измеряет полноту иРНК (информационной РНК), и послужит инструментом нового поколения, полученным недавно благодаря фонду «Банка дель Монте». Вкратце, будет проведена оценка числа фентипической экспрессии гена лейкоцитами из простой пробы крови 5 – 7 пациентов до и через месяц после лечения Токотриенолом. Эти данные также сравниваться с показателями здоровых участников исследования. Это исследование было решено провести, поскольку при лечении подобного заболевания – семейной дизавтономии — применение Токотриенола частично разблокировало ДНК у пациентов и, таким образом, повысило способность к производству дефицитных белков. 
Таким образом, мы хотим проверить, обладает ли препарат, помимо свойства бороться с недостатком фратаксина, ответственного за окислительный стресс, определенным лечебным свойством, т.е. позволяет ли нормализовать, хотя бы частично, транскрипцию генов.
Вторая часть исследования будет проведена in vitro, т.е. на культуре клеток. Во время одной хирургической операции мы взяли и заморозили образец мышечной ткани пациента с АФ. Этот образец будет разморожен и помещен в питательную среду с целью получить достаточное число клеток, на которых можно исследовать воздействия различных концентраций Токотриенола. На этих клетках мы также планируем исследовать транскрипцию гена, ответственного за синтез фратаксина, а также попробовать понять механизмы, происходящие на молекулярном уровне.

Источник: сайт Итальянской ассоциации борьбы с синдромом атаксии